שיטות מיקרוסקופיות במיקרוביולוגיה

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. שיטות מחקר מיקרוסקופיות דרכים לחקור מגוון של חפצים עם השימוש בציוד מיוחד. זה מאפשר לנו לבחון את המבנה של חומרים ואורגניזמים, סדר הגודל של שהינה מעבר לגבולות ברזולוציה של העין האנושית. המאמר נותן ניתוח קצר של השיטות המיקרוסקופיות.

סקירה

используют в своей практике разные специалисты. שיטות מודרניות של בדיקה מיקרוסקופית באמצעות מומחים שונים בעבודתם. ביניהם יש את וירולוגים, ציטולוגיה, המטולוגיה, מורפולוגיה, ואחרים. השיטות העיקריות של בדיקה מיקרוסקופית ידועות מזה זמן רב. הראשונה היא דרך אור של הסתכלות חפצה. בשנים האחרונות, הציג באופן פעיל לפועל, וטכנולוגיות אחרות. . לפיכך, הפופולריות של שלב בניגוד רכשה, זורח, הפרעה, קיטוב, אינפרא אדום, סגול, שיטת סטריאוסקופית של המחקר. כולם מבוססים על מגוון רחב של תכונות האור. . בנוסף, נעשה שימוש נרחב בשיטות מיקרוסקופיה אלקטרונית. שיטות אלה מאפשרות האובייקטים המוצגים באמצעות זרימה כיוונית של חלקיקים טעונים. יצוין כי שיטות מחקר אלה משמשות לא רק בביולוגיה וברפואה. в промышленности. שיטה פופולרית למדי של מחקר מיקרוסקופי של מתכות וסגסוגות בענף. זה מאפשר לימוד להעריך את ההתנהגות של תרכובות לייצר טכנולוגיות כדי למזער את ההסתברות של שבר וכוח מוגבר.

דרכים קלות: מאפיינים

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. שיטות מיקרוסקופיות כזה לחקר מיקרואורגניזמים ומתקנים אחרים המבוסס על שונה ברזולוצית ציוד. גורם חשוב שזה הכיוון של מאפייני הקרן של האובייקט עצמו. זה האחרון, בפרט, יכול להיות שקוף או אטום. בהתאם למאפיינים של האובייקט, לשנות את התכונות הפיסיקליות של שטף האור - בהירות וצבע עקב משרעת ואורך הגל, מטוס, פאזה לכיוון התפשטות הגל. . על השימוש במאפיינים אלה ולבנות שיטות מיקרוסקופיות שונות.

סגולי

כדי ללמוד את דרכי אובייקטים בהירים, בדרך כלל מוכתם. זה מאפשר לזהות ולתאר תכונות אלה או אחרים. זה הכרחי כי הרקמה תוקנה, מאז הצביעה לחשוף מבנים מסוימים באופן בלעדי בתאי נהרג. בתאים חיים להפריד צבע בצורה וקואולות בציטופלסמה. היא אינה מציירת מעל המבנה. אבל עם האובייקטים הפעילים ויכול להיחקר באמצעות מיקרוסקופ אור. לשם כך, דרך חיונית של למידה. במקרים כאלה, מעבה darkfield. זה מוטבע מיקרוסקופ אור.

חקירת חלקים לא צבועים

זה מתבצע על ידי מיקרוסקופ שלב ניגודיות. שיטה זו מבוססת על העקיפה של הקרן בהתאם למאפיינים של האובייקט. במהלך החשיפה סימנה שינוי פאזה גל. בשנת עדשת המיקרוסקופ הוא צלחת שקופה נוכחית. חי או קבוע, אבל לא חפצים צבוע בשל השקיפות שלה, כמעט לא משנה את צבעם, ואת משרעת של הקרן עובר דרכם, מעורר שינוי רק השלב הגל. אבל במקרה הזה, לאחר שעבר את האובייקט, השטף מהאור מוחזר על ידי הצלחת. כתוצאה מכך, בין הקורות, חסר דרך האובייקט וכניסת רקע בהיר, ההבדל באורך הגל מתרחש. לפי שווי מסוים של האפקט החזותי שלה מתרחש - האובייקט הכהה יהיה גלוי בבירור על רקע בהיר, או להיפך (בהתאם למאפיינים של צלחת שלב). כדי להשיג הבדל זה צריך להיות לפחות 1/4 אורך גל.

שיטת Anoptralny

הוא סוג של שיטת שלב ניגודיות. שיטת Anoptralny כרוכה בשימוש עדשה עם הצלחות מיוחדות, אשר לשנות רק את הצבע והבהירות של אור הסביבה. זה מאוד מרחיב את האפשרויות של חקירת חלקי חי רבב. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. מחקר שיטה לעומת שלב מיקרוסקופ יישומית במיקרוביולוגיה, פרזיטולוגיה בחקר תאים בצמחים ובבעלי חיים, פרוטוזואה. בשיטת המטולוגיה משמשת לחישוב ולקבוע את הבידול של תאי הדם במח העצם.

טכניקות התערבות

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. שיטות מחקר מיקרוסקופיים אלה לפתור את אותן בעיות בדרך כלל בניגוד שלב. עם זאת, במקרה זה האחרון, מומחים יכולים לצפות את קווי המתאר של עצמים בלבד. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. שיטות המחקר המיקרוסקופיות ההפרעה מאפשרות לנו ללמוד מצדם, לבצע אלמנטי הערכה כמותית. זה אפשרי עקב הפיצול של קרן האור. זרם אחד עובר אובייקט החלקיקים, והשני - על ידי. בשנות ה העינית של המיקרוסקופ הם נפגשים ולהפריע. הבדל השלב והתוצאה יכול להיקבע לפי משקל של מבנים תאיים שונים. כאשר מדידה רציפה היא עם מראש מקדם שבירה ניתן להגדיר רקמות מבולבלות עבות חפץ חיים, את תכולת החלבון בם, ריכוז מוצקים ומים, וכן הלאה. בהתאם מומחי נתונים שהתקבלו מסוגלים להעריך בעקיפין חדירות הממברנה, פעילות אנזים, חילוף חומרים בתא.

קיטוב

הדבר מתבצע באמצעות ניקול מנסרות או תמונות פולרואיד ועכורה. הם ממוקמים בין הדגימה לבין מקור האור. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. שיטה מיקרוסקופית מקטב של מחקר במיקרוביולוגיה מאפשר לנו לחקור עצמים בעלי תכונות הומוגניות. בשנת מבנים איזוטרופיים את מהירות התפשטות האור היא עצמאית של המטוס שנבחר. בשיעור מערכות אנאיזוטרופיות משתנה בהתאם לאור אוריינטציה לאורך רוחבי או ציר האורך של האובייקט. אם הערך מקדם השבירה לאורך המבנה יהיה גדול מ לאורך רוחבי, יוצר שבירה כפולה חיובית. זה אופייני של אובייקטים ביולוגיים רבים שמצאו אוריינטציה מולקולרית קפדנית. כולם הם איזוטרופי. בקטגוריה זו, בפרט, במיופיברילים, neurofibrils, הריסים באפיתל ריסי, סיבי קולגן, ואחרים.

ערך קיטוב

השוואה בין אופי הקרינה ואת אנאיזוטרופיה מקדם השבירה של האובייקט מאפשרת להעריך את המבנה המולקולרי של הארגון. שיטת קיטוב משמשת באחת משיטות ניתוח היסטולוגית המשמשות ציטולוגיה וכן הלאה. לא רק חפצים צבועים ניתן ללמוד באספקלריה. שיטת קיטוב מאפשרת לבחון בטהרתם מבולבלת - יליד - הכנות של קטעי רקמה.

טכניקות פלורסנט

הם מבוססים על המאפיינים של אובייקטים מסוימים ולתת זוהר בחלק כחול-סגול של קרני קשת או UV. חומרים רבים כגון חלבונים, ויטמינים, coenzymes, סמים, ניחן הארה עיקרית (en). חפצים אחרים מתחילים לזהור על ידי הוספת fluorochrome - צבעים מיוחדים. תוספים אלו הם סלקטיבי דיפוזי או מופץ לתוך מבנים הסלולר נפרדים או תרכובות כימיות. מאפיין זה היה הבסיס של השימוש מיקרוסקופ פלואורסצנטי עם histochemical ו מחקרי ציטולוגיה.

תחומי השימוש

מומחים חיסוני קרינה באמצעות לזהות אנטיגנים נגיפיים וריכוזם המותאם מזוהי וירוסי גופים ו אנטיגנים אנטי, הורמונים, מוצרים מטבוליות שונים וכן הלאה. בהקשר זה, האבחנה של הרפס, חזרת, צהבת B, שפעת וזיהומים אחרים בשיטות פלורסנט של מחקר חומרים. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. שיטה חיסונית פלורסנט מיקרוסקופית מזהה ממאירות גידול, לקבוע אזורים איסכמי של הלב בשלבים המוקדמים של התקף לב וכן הלאה.

השימוש אולטרה סגול

היא מבוססת על היכולת של מספר החומרים בתאים חיים או מיקרואורגניזמים הם קבועים, אלא צבועים שקופים תחת בדי אור הנראה לספוג קרן UV באורך גל מסוים. הדבר נכון במיוחד עבור תרכובות גבוהות מולקולריות. אלה כוללים חלבונים, חומצות ארומטיות (methylalanine, טריפטופן, טירוזין, וכו '), חומצות גרעין ובסיסי purine piramidinovye וכן הלאה. מיקרוסקופ UV מאפשר לציין את המיקום ואת מספר תרכובות אלה. במחקר של יצורי חי מקצוע יכול לצפות שינויים בתהליכי חילוף החומרים שלהם.

בנוסף

מיקרוסקופיה אינפרא אדום משמש במחקר הן אטומות לאור הקרניים האולטרה סגולות דרך הקליטה של אובייקטים לזרום מבנים גל אשר 750-1200 ננומטר. כדי להחיל שיטה זו אין צורך מראש לחשוף את התרופות לטיפול כימי. בדרך כלל, שיטת IR משמשת באנתרופולוגיה, זואולוגיה ומדעים אחרים בתעשייה. באשר רפואה, שיטה זו משמשת בעיקר ברפואת עיניים ו Neuromorphology. האובייקטים-ממדי במחקר באמצעות מיקרוסקופ סטריאוסקופי. עיצוב החומרה מאפשרת ניטור עין שמאל וימין בזווית שונה. חפצים אטומים נחקרים בהגדלה נמוכה יחסית (120 פעמים לכל היותר). שיטות סטריאוסקופית משמשות המיקרו-כירורגיה, Pathomorphology ברפואה משפטית.

במיקרוסקופ אלקטרונים

הוא משמש כדי לחקור את המבנה של תאים ורקמות ברמות מולקולארית ו התת-תאי. במיקרוסקופ אלקטרונים אפשר לנו לבצע קפיצה איכותית בתחום המחקר. שיטה זו נמצאת בשימוש נרחב בביוכימיה, אונקולוגיה, וירולוגיה, מורפולוגיה, אימונולוגיה, גנטיקה, ובתחומים אחרים. שיפור משמעותי של הרזולוציה שמספקת תזרים קיבולת הציוד של אלקטרונים שעוברים בשדה הוואקום אלקטרומגנטית. זה האחרון, בתורו, ליצור עדשות מיוחדות. אלקטרונים יכולים לעבור דרך המבנה של האובייקט או משתקף מהם עם סטיות מזוויות שונות. התוצאה מוצגת על מסך הניאון של המכשיר. אם נוף מישורי מיקרוסקופ השידור המתקבל בעת הסריקה להקיף בהתאמה.

תנאים מוקדמים

ראוי לציין כי לפני הבדיקה המיקרוסקופית האלקטרונית לעבור, האובייקט הוא נתון הכשרה מיוחדת. בפרט, שימוש קיבוע פיזי או כימי של רקמות ואורגניזמים. חומר ביופסיה סקציות, ובנוסף, dewatered, מוטבע שרף אפוקסי, לחתוך סכיני זכוכית או יהלום על סעיפי ultrathin. אז בניגוד והלימודי שלהם. מיקרוסקופ הסריקה בוחן את פני השטח של עצמים. כדי לעשות זאת, הם ריססו חומר מיוחד בתא ואקום.